توضیحات
۱- ناباروری
۱-۱- علل ناباروری در مردان
۱-۲- رادیکالهای آزاد
۱-۲-۱- تعریف و نحوه تشکیل رادیکالهای آزاد
۱-۲-۲- نحوه عملکرد رادیکالهای آزاد
۱-۲-۳- گونههای فعال اکسیژن و نیتروژن
۱-۲-۳-۱- نقشهای بیولوژیک ROS
۱-۲-۴- تولید و منبع رادیکالهای آزاد
۱-۲-۴-۱- تولید ROS توسط اسپرماتوزوآی غیر طبیعی
۱-۲-۴-۲- تولید ROS توسط لکوسیتها
۱-۲-۵- استرس اکسیداتیو
۱-۲-۵-۱- مکانیسم عملکرد استرس اکسیداتیو
۱-۲-۵- اثرات استرس اکسیداتیو
۱-۲-۵-۱- استرس اکسیداتیو و آسیب به DNA
۱-۲-۶-۱-۲- اهمیت سلامت DNA اسپرم
۱-۲-۶-۲-استرس اکسیداتیو در اسپرم
۱-۲-۶-۳- استرس اکسیداتیو و بیماریهای دیگر
۱-۲-۷- اثراتROS
۱-۲-۷-۱- پراکسیداسیون لیپیدی غشای پلاسمایی اسپرم
۱-۲-۷-۲- اثر روی تحرک اسپرم
۱-۲-۸- ROS و استرس اکسیداتیو مایع منی
۱-۲-۹- ROS و ناباروری
۱-۲-۱۰- آنتی اکسیدانها
۱-۲-۱۰-۱- نحوه عملکرد آنتیاکسیدانها به دو روش طبقه بندی میشود:
۱-۲-۱۱- اثرات آنتیاکسیدانها
۱-۲-۱۱-۱- تاثیر بر تحرک اسپرم
۱-۲-۱۱-۲- تاثیر بر روی کاهش آسیبهای بعد از انجماد اسپرم
۱-۲-۱۱-۳- تاثیر آنتیاکسیدانها در جلوگیری از آسیب بهDNA
۱-۲-۱۲- نقش آنتیاکسیدانها (ربایندههایبالقوهROS) دراسپرم
۳-۱- ژنتیک و ناباروری مردان
۱-۳-۱- ژن انتخابی مورد مطالعه
۱-۴- اهداف:
۱-۵-فرضیات:
فصل دوم مروری بر مطالعات گذشته
۲-۱- مروری بر مطالعات علمی گذشته
فصل سوم مواد و روشها
۳-۱- تعیین گروههای آزمایشی
۳-۲- جمع آوری نمونهها و محل انجام آزمایش
۳-۳- القاء استرس اکسیداتیو با تزریق t-BHP
۳-۴- تک سلول کردن بافت بیضه
۳-۵- شمارش تعداد سلولهای زنده در بافت بیضه
۳-۶-۱- روش فلوسایتومتری
۳-۶-۲- سنجش ROS در بیضه بوسیله فلوسایتومتری
۳-۷- روشهای تعیین آسیب DNA اسپرم
۳-۷-۱- تست TUNEL جهت ارزیابی شکست DNAاسپرم
۳-۷-۲- جمع‌آوری سلولهای اسپرمی جهت آنالیز شکستهای DNA اسپرم
۳-۷-۳- محلولها و بافرهای مورد نیاز جهت روش TUNEL، به منظور ارزیابی شکست DNA اسپرم
۳-۷-۴- مراحل انجام آزمایش TUNEL
۳-۷-۵- نحوه استفاده از کیت TUNEL
۳-۸- بررسی بیان ژن Kdm5d یا Smcy
۳-۸-۱- استخراج RNA به روش ترایزول
۳-۸-۲- بررسی کیفی RNAهای استخراج شده به وسیله الکتروفورز روی ژل آگارز
۳-۸-۳- تیمار کردن نمونههای RNAی استخراج شده
۳-۸-۴- سنتزDNA مکمل (cDNA) از روی الگوی RNA
۳-۸-۵- روش انجام واکنش زنجیرهای پلی مراز (PCR) جهت اطمینان از سنتز cDNA
۳-۸-۶-روش تهیهی ژل آگارز و انجام الکتروفورز
۳-۸-۷- طرز تهیهی محلولها
۱- بافر۵۰x TAE
۲- محلول رنگ آمیزی اتیدیوم برماید (۱۰mg/ml)
۳-۸-۸- بررسی کمی بیان ژن با استفاده از روش واکنش زنجیرهای پلیمرازپیوسته
۳-۸-۸-۱-روش Ct مقایسهای برای کمی سازی نسبی
۳-۸-۶- آنالیز آماری
فصل چهارم نتایج
۴-۱- بررسی وزن بدن و بافت بیضه پس از ۱۴ روز تزریق
۴-۲- بررسی ماکروسکوپی بافت بیضه
۴-۳- بررسی میزان ROS در بیضهی گروه کنترل و آزمون
۴-۳-۱- اندازه گیری میزان O2 و H2O2
۴-۴- نتایج ارزیابی شکست DNA اسپرم با تست TUNEL
۴-۵- بررسی وضعیت بیانی ژن Kdm5d در بافت بیضه
۴-۵-۱- استخراج RNA کل از بافت بیضه
۴-۵-۲- بررسی صحت سنتز cDNA
۴-۵-۳- بررسی بیان کمی ژن Kdm5d در بافت بیضه
فصل پنجم بحث و نتیجه گیری
۵-۱- بحث و نتیجه گیری کلی
۵-۲- پیشنهادات:
منابع
خلاصه انگلیسی
نقد و بررسی‌ها
هنوز بررسی‌ای ثبت نشده است.