توضیحات
فصل اول: مقدمه
۱-۱- آنزیمها
۱-۲- لیپازها
۱-۲-۱- ارتباط ساختار آنزیم لیپاز با عملکرد آن
۱-۳- آنزیمها در محیط آلی
۱-۴- مایعات یونی
۱-۵- بیوکاتالیز در مایعات یونی
۱-۵-۱- آنزیمها در مخلوطهای مایع یونی – آب
۱-۵-۲- فعالیت آنزیمها در شرایط نسبتا بی آب در مایعات یونی
۱-۵-۳- پایداری آنزیمها در مایعات یونی تقریبا بی آب
۱-۵-۴- آنزیمها، مایعات یونی، پیوندهای هیدروژنی و فعالیت
۱-۵-۵- بیوترانسفورماسیون در محیط مایعات یونی توسط لیپازها و استرازها
۱-۶- بررسی ساختار پروتئین به روش اسپکتروسکوپی فلورسانس
فصل دوم: مروری بر پژوهشهای پیشین
۲-۱- پیشینه کاربرد مایعات یونی در بیوکاتالیز
۲-۲- اثر مایعات یونی مختلف بر فعالیت و پایداری آنزیم
۲-۳- بررسی ساختار آنزیمها در مایعات یونی
اهداف
فرضیه
فصل سوم: مواد و روشها
۳-۱- ابزار
۳-۲- مواد
۳-۲-۱- مواد لازم جهت تهیه مایعات یونی
۳-۲-۲- مواد لازم جهت تهیه آنزیم لیپاز درون سلولی TTL
۳-۲-۲-۱- سوش باکتری
۳-۲-۲-۲- مواد مورد نیاز برای ترانسفورماسیون
۳-۲-۲-۳- مواد مورد نیاز برای کشت باکتری و استخراج عصاره سلولی
۳-۲-۲-۴- مواد مورد نیاز برای تخلیص آنزیم لیپاز
۳-۲-۲-۵- مواد مورد نیاز برای سنجش کمی میزان پروتئین و ژل SDS PAGE
۳-۲-۳- مواد مورد نیاز برای سنجش فعالیت آنزیمی لیپاز
۳-۲-۴- نرم افزارها
۳-۳- روشها
۳-۳-۱- روش تهیه مایعات یونی
۳-۳-۱-۱- روش تهیه مایعات یونی با آنیون برمید
۳-۳-۱-۲- روش تهیه مایعات یونی با آنیون هگزافلوروفسفات
۳-۳-۲- روش کشت باکتری و بیان القایی پروتئین نو ترکیب
۳-۳-۲-۱- محیط کشت باکتری E. coli
۳-۳-۲-۲- انتقال DNA خارجی به باکتری E.coli
۳-۳-۲-۲-۱- تهیه سلول های مستعد به روش شیمیایی
۳-۳-۲-۲-۲- انتقال پلاسمید به سلول مستعد
۳-۳-۲-۳- روش تهیه استوک باکتری
۳-۳-۲-۴- کشت باکتری و القای بیان آنزیم نوترکیب
۳-۳-۲-۵- بهینه سازی بیان آنزیم نوترکیب
۳-۳-۲-۵- ۱- انتخاب بهترین کلنی از نظر بیان آنزیم TTL
۳-۳-۲-۵-۲- انتخاب بهترین زمان پس از القا
۳-۳-۲-۶- استخراج عصاره سلولی حاوی لیپاز TTL
۳-۳-۳- روش تخلیص آنزیم لیپاز TTL
۳-۳-۳-۱- روش رسوب دهی دمایی
۳-۳-۳-۱-۱- بهینه سازی رسوب دهی دمایی
۳-۳-۳-۲- روش تخلیص به کمک ستون کروماتوگرافی
۳-۳-۴- روش سنجش کمی پروتئین
۳-۳-۴-۱- سنجش کمی میزان پروتئین به روش برادفورد
۳-۳-۴-۲- سنجش کمی میزان پروتئین به روش جذب nm 280
۳-۳-۵- الکتروفورز ژل پلی آکریل آمید با SDS (SDS-PAGE)
۳-۳-۵-۱- آماده سازی محلولهای الکتروفور
۳-۳-۵-۲- آماده سازی سیستم الکتروفورز
۳-۳-۶- سنجش فعالیت آنزیمی با سوبسترای پارانیتروفنیل پالمیتات
۳-۳-۷- روش بررسی فعالیت آنزیمی در حضور غلظت های مختلف از انواع مایعات یونی
۳-۳-۸- روش بررسی پایداری دمایی آنزیم TTL در دماهای بالا
۳-۳-۹- روش بررسی پایداری آنزیم لیپاز TTL در حضور مایعات یونی مختلف
۳-۳-۱۰- روش بررسی ساختار سوم آنزیم TTL در حضور مایعات یونی
فصل چهارم: نتایج
۴-۱- بهینه سازی بیان آنزیم نوترکیب
۴-۱-۱- انتخاب بهترین کلنی از نظر بیان آنزیم TTL
۴-۱-۲- بهینه سازی زمان پس از القا
۴-۲- تخلیص آنزیم لیپاز TTL
۴-۲-۱- بهینه سازی تخلیص نسبی به روش رسوب دهی دمایی
۴-۲-۲- تخلیص به کمک ستون کروماتوگرافی Q- سفاروز
۴-۳- سنتز مایعات یونی
۴-۴- اثر مایعات یونی بر فعالیت هیدرولازی آنزیم TTL
۴-۵- اثر مایعات یونی بر پایداری دمایی آنزیم TTL
۴-۵-۱- پایداری دمایی TTL در عدم حضور مایعات یونی
۴-۵-۲- پایداری دمایی آنزیم TTL در حضور مایعات یونی
۴-۵-۲-۱- بررسی پایداری TTL در [C4MIM][Br] و ] [C4MIM][PF6 در دماهای مختلف
۴-۵-۲-۲- مقایسه اثر نوع آنیون مایعات یونی بر پایداری دمایی
۴-۵-۲-۳- مقایسه اثر نوع کاتیون و طولهای مختلف زنجیره کربنی مایعات یونی بر پایداری دمایی آنزیم
۴-۶- بررسی ساختار سوم آنزیم در حضور و عدم حضور مایعات یونی
فصل پنجم: بحث
۵-۱- اثر مایعات یونی بر فعالیت هیدرولازی آنزیم TTL
۵-۲- اثر مایعات یونی بر پایداری دمایی آنزیم TTL
۵-۳- بررسی ساختار سوم آنزیم در حضور مایعات یونی
فصل ششم: نتیجه گیری و پیشنهادات
۶-۱- نتیجه گیری
۶-۲- پیشنهادات
نقد و بررسی‌ها
هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.