توضیحات
۱-۱ مقدمه
۱-۲ ناقلهای مورد استفاده در ژن‌درمانی
۱-۲-۱ ناقلهای ژنی ویروسی
۱-۲-۲ ناقلهای ژنی غیر ویروسی
۱-۲-۳ باکتریوفاژها
۱-۳ باکتریوفاژ لامبدا
۱-۳-۱ بیولوژی باکتریوفاژ لامبدا
۱-۳-۲ ساختار فاژ لامبدا
۱-۳-۳ سازماندهی ژنوم فاژ لامبدا
۱-۳-۴ چرخه زندگی فاژ لامبدا
۱-۳-۵ فاژ لامبدا به عنوان ناقل ژنی
۱-۴ باکتریوفاژ M13
۱-۴-۱ بیولوژی باکتریوفاژ M13
۱-۴-۲ ساختار باکتریوفاژ M13
۱-۴-۳ سازماندهی ژنومی باکتریوفاژ M13
۱-۴-۴ چرخه زندگی باکتریوفاژ M13
۱-۴-۵ فاژ M13 به عنوان ناقل ژنی
۱-۵ اهمیت و اهداف پژوهش
۲-۱ روش تهیه محلول‌ها و بافرها
۲-۱-۱ تهیه محلول ۱ مولار تریس
۲-۱-۲ تهیه کلرید کلسیم ۵۰ میلی‌مولار
۲-۱-۳ تهیه محلول EDTA 0.5 M PH=8
۲-۱-۴ تهیه SDS10%
۲-۱-۵ تهیه بافر TE
۲-۱-۶ تهیه TBE 10X
۲-۱-۷ تهیه ژل آگارز %۱
۲-۱-۸ تهیه بافر SM
۲-۱-۹ تهیه PBS
۲-۱-۱۰ تهیه تریپسین- EDTA 0.25%
۲-۱-۱۱ تهیه پارافرمالدهید % ۴
۲-۱-۱۲ تهیه محلول سدیم آزید %۰۱/۰
۲-۲ تهیه محیط‌های کشت
۲-۲-۱ محیط کشت باکتری LB مایع
۲-۲-۲ محیط کشت LB مایع همراه با مکمل
۲-۲-۳ محیط کشت LB جامد
۲-۲-۴ تهیه محیط کشت NZY Agar:
۲-۲-۵ تهیه محیط NZY Top Agar:
۲-۲-۶ تهیه محیط ۲x YT
۲-۳ ناقلهای مورد استفاده در پژوهش
۲-۳-۱ ناقلهای فاژی Lambda ZAP®-CMV XR و pCMV Script Ex
۲-۴ باکتری‌های مورد استفاده در پژوهش
۲-۴-۱ باکتری E.coli سویه XL1-Blue MRF´
۲-۴-۲ باکتری E.coli سویه XLOLR
۲-۵ کار با رده‌های سلولی
۲-۵-۱ ساخت محیط کشت
۲-۵-۲ افزودن سرم و تهیه محیط کشت کامل
۲-۵-۳ انجماد رده‌های سلولی
۲-۶ مراحل انجام پژوهش به صورت گام به گام
۲-۶-۱ کار با باکتریوفاژ لامبدا
۲-۶-۲ کار با باکتریوفاژ M13
۲-۶-۳ کشت و پاساژ رده‌ی سلول AGS
۲-۶-۴ ترانسفکشن سلولهای AGS توسط ذرات فاژی M13-GFP
۲-۶-۵ استخراج فرم دورشته‌ای همانندساز سازه ژنی pCMV Script GFP
۲-۶-۶ محاسبه تعداد نسخه‌های سازههای فاژی λ-ZAP-CMV-GFP و pCMV Script GFP
۲-۶-۷ ترانسفکشن سلولهای AGS توسط سازههای فاژی λ-ZAP-CMV-GFP و pCMV Script GFP
۲-۶-۸ بررسی ورود سازههای فاژی λ-ZAP-CMV-GFP و pCMV Script GFP به رده سلولی AGS
۳-۱ تأیید سازه ژنی λ-ZAP-CMV-GFP و ذرات فاژی λ-GFP
۳-۲ تکثیر ذرات فاژی λ-GFP و تعیین تیتر آن
۳-۳ ساخت ذرات فاژی M13 حاوی توالی GFP
۳-۳-۱ تأیید کلونی‌های حاوی سازه ژنی pCMV Script GFP
۳-۳-۲ تکثیر ذرات فاژی M13-GFP
۳-۳-۳ انتقال و بیان ژن GFP توسط ذرات فاژی M13-GFP
۳-۳-۴ بررسی ورود ذرات فاژی M13-GFP به سلولهای AGS
۳-۳-۵ استخراج ssDNA از ذرات فاژی M13-GFP
۳-۳-۱ استخراج فرم دورشته‌ای همانندساز ناقل M13-GFP
۳-۴ استخراج λ-DNA
۳-۵ محاسبه تعداد نسخه‌های سازههای ژنی λ-ZAP-CMV-GFP و pCMV Script GFP
۳-۶ ترانسفکشن سلولهای AGS توسط سازههای استخراج شده از ذرات فاژی M13-GFP و
۳-۶-۱ بررسی بیان ژن GFP توسط میکروسکوپ فلورسانس
۳-۶-۲ بررسی کارآیی انتقال و بیان ژن GFP توسط دستگاه فلوسیتومتری
۳-۶-۳ بررسی شدت بیان ژن GFP در سلولهای AGS
۴-۱ تهیه ذرات M13-GFP و بررسی کارآیی ترانسفکشن سلول های AGS توسط آنها
۴-۱-۱ بررسی انتقال و بیان ژن GFP توسط ذرات فاژی M13-GFP
۴-۱-۲ بررسی ورود ذرات فاژی M13-GFP به سلولهای AGS
۴-۲ بررسی کارآیی انتقال و بیان ترانسژن توسط سازههای λ-ZAP-CMV-GFP و pCMV Script GFP
۴-۲-۱ بررسی کارآیی انتقال و بیان ژن GFP توسط میکروسکوپ فلورسانس
۴-۲-۲ بررسی کارآیی انتقال و بیان ژن GFP به کمک تکنیک فلوسیتومتری
۴-۳ نتیجه‌گیری
۴-۴ پیشنهادات
نقد و بررسی‌ها
هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.