توضیحات
فصل اول: مقدمه
۱-۱-مقدمه
۱-۲-انجماد
۱-۲-۱-تاریخچه ی انجماد
۱-۲-۲-تکنیک های مختلف انجمادی
۱-۲-۲-۱-انجماد آهسته
۱-۲-۲-۲-انجماد شیشه ای
۱-۲-۳-محلول های انجمادی
۱-۲-۳-۱-ضدیخ ها
۱-۲-۳-۲-سرم
۱-۲-۴-تاثیرات انجماد بر بافت بیضه
۳- ۱-۳-پیوند
۴- ۱-۴-کشت
۵- ۱-۵-تغییرات ملکولی متاثر از انجماد
۱-۵-۱-آپوپتوزیس
۱-۵-۱-۱-مسیر خارجی آپوپتوز و ژن های دخیل در آن
۱-۵-۱-۲-مسیرداخلی آپوپتوز و ژنهای دخیل در آن
۱-۵-۱-۳-P53
۱-۵-۱-۴-کاسپاز ۳
۱-۶-هدف
۱-۷-پرسش پژوهشی
۱-۸-فرضیات
فصل دوم : مواد و روش ها
۲-۱-تهیه ی بافت بیضه و گروه های مورد مطالعه
۲-۲-انجماد شیشه ای بافت بیضه
۲-۲-۱-روش تهیه محیط پایه
۲-۲-۲-روش تهیه محلول های انجماد شیشه ای
۲-۲-۲-۱-روش آماده سازی محلول انجمادی I
۲-۲-۲-۲-روش آماده سازی محلول انجمادی II
۲-۲-۳-مراحل انجماد شیشه ای
۲-۲-۳-۱-روش انجمادی I
۲-۲-۳-۲-روش انجمادی II
۲-۲-۴-ذوب بافت بیضه
۲-۲-۴-۱-روش تهیه محلول های ذوب
۲-۲-۴-۲-مراحل ذوب
۲-۵-مطالعات میکروسکوپی و بافت شناسی بافت بیضه
۲-۶-بررسی آپوپتوز و بقا سلولی
۲-۶-۱-هضم مکانیکی و آنزیمی بافت بیضه
۲-۶-۱-۱-هضم مکانیکی
۲-۶-۱-۲-هضم آنزیمی
۲-۶-۱-۳-خنثی سازی اثر آنزیم و بررسی بقا با استفاده از رنگ PI
۲-۶-۲-ارزیابی بقای سلولی به روش فلوسایتومتری
۲-۶-۳-بررسی آپوپتوز سلولی
۲ -۷-کشت بافت بیضه
۲-۷-۱-آماده سازی آگار
۲-۷-۲-آماده سازی محیط کشت
۲-۷-۲-۱-روش تهیه محیط RPMI
۲-۷-۳-کشت بافت بیضه
۲-۸-ارزیابی ژن های آپوپتوزی
۲-۸-۱-نگهداری بافت در محلول RNA-later
۲-۸-۲-استخراج RNA با استفاده از ترایزول
۲-۸-۲-۱-هموژن کردن بافت
۲-۸-۲-۲-مرحله ی جداسازی
۲-۸-۲-۳-رسوب RNA
۲-۸-۲-۴-شستشو RNA
۲-۸-۳-بررسی کیفی RNA های استخراج شده
۲-۸-۴-تیمار نمونهیRNA با استفاده از DNase1 جهت حذف آلودگی ژنومی
۲-۸-۵-سنتز cDNA
۲-۸-۶-پرایمر
۲-۸-۶-۱-آماده سازی پرایمرها
۲-۸-۶-۲-بررسی جایگاه اتصال پرایمرها
۲-۸-۷-الکتروفورز
۲-۸-۷-۱-روش ساخت بافر۵۰X TAE
۲-۸-۷-۲-روش ساخت بافر X TAE1
۲-۸-۷-۳-طرز تهیه ی ژل آگارز
۲-۸-۷-۴-بررسی آلودگی پرایمر
-۸-۷-۴-بررسی کیفیت RNA
۲-۸-۸-بررسی گرادیانت دمایی پرایمر
۲-۸-۹ Real-Time PCR
۲-۸-۹-۲-بررسی کمی بیان ژن با استفاده از روش Real-Time PCR
۲-۹-آنالیز آماری داده
فصل سوم: نتایج
۳-۱-بررسی مورفولوژی بافت بوسیله رنگ آمیزی هماتوکسیلین و ائوزین
۳-۲-مقایسه بقای سلولی در گروه کنترل با گروه های انجمادی I و II بلافاصله پس از ذوب
۳-۳-بررسی میزان وقوع آپوپتوز پس از کشت بافت بیضه
۳-۳-۱-ارزیابی میزان بقای سلولی طی کشت بافت بیضه
۳-۳-۲-آپوپتوز اولیه ی سلولی طی کشت بافت بیضه
۳-۳-۳-بررسی میزان وقوع آپوپتوز پس از کشت بافت بیضه
۳-۳-۴-نکروز بافتی طی کشت بافت بیضه
۳-۴-بررسی بیان ژن های آپوپتوزی در سطح رونوشت
۳-۴-۱-بررسی بیان رونوشت ژن های دخیل در مسیر های آپوپتوزی
۳-۴-۲-Bax
۳-۴-۳-BCL2
۳-۴-۴-نسبت بیان BAX به BCL2
۳-۴-۵-Caspase3
۳-۴-۶-Fas
۳-۴-۷-Fas Ligand
۳-۴-۸-P53
۲۷- فصل چهارم: بحث
۴-۱-کلیات
۴-۲-بررسی های مورفولوژیک در ساعات مختلف کشت در گروه های مورد مطالعه
۴-۳-بررسی بقا و آپوپتوز سلولی در گروه های مورد مطالعه
۴-۴-بررسی بیان ژن های مرتبط با وقوع آپوپتوز در گروه های مورد مطالعه
۴-۵-نتیجه گیری
۴-۶-پیشنهادات
نقد و بررسی‌ها
هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.