توضیحات
فصل اول کلیات
پیشینه تاریخی
آماده سازی الآسپاراژیناز قابل استفاده برای درمان
آزمایش های بالینی با الآسپاراژیناز ۰
خصوصیات شیمیایی و داروشناسی این دارو
اثر ضد سرطانی
ترکیبات شیمیایی داروی در دسترس برای درمان
آنزیم طبیعی
آنزیم تغییریافته
فارماکوکنتیک
مقاومت دارویی
تأثیر دارویی
سمیّت
فصل دوم روش کار
مواد و میکروارگانیسم ها
کشت باکتری
اعمالUV در زمان های مختلف
انجام تست Nesslerization به منظور بررسی مقدار آمونیاک آزاد شده
کشت کلنی ها
تعیین غلظت آمونیاک آزاد شده در محلول واکنش توسط الآسپاراژیناز کلنی ها
محلول های لازم برای سنجش میزان فعالیت آنزیم الآسپاراژیناز کلنی ها
استخراج DNA 0
کشت باکتری به منظور استخراج DNA 0
استخراج DNA ژنومی
واکنش زنجیره ای پلیمراز(PCR)
الکتروفورز بر روی ژل آگارز
خالص سازی محصول PCR
استخراج پلاسمید
۰ هضم آنزیمی و کلون کردن قطعه در داخل وکتور
۰ الگوی برش آنزیمی ژن الآسپاراژیناز ll
۰ برش و آماده سازی وکتور pETa(+)
۰ واکنش الحاق وکتور pETa(+) با قطعه ژنی الآسپاراژینازll
ایجاد سلول های Competant و انتقال پلاسمید
انتخاب کلون های مثبت ۰
تأیید کلنی های نوترکیب با PCR و هضم آنزیمی
PCR
هضم آنزیمی
بیان و استخراج پروتئین بیان شونده توسط ژن آنزیم الآسپاراژیناز ll
القاء بیان پروتئین آنزیمی الآسپاراژیناز ll
استخراج پروتئین های آنزیمی الآسپاراژیناز ll و الآسپاراژیناز l
بررسی اولیه بیان پروتئین نوترکیب الآسپاراژیناز ll و پروتئین الآسپاراژیناز l با SDS
PAGE
تعیین فعالیت آنزیمی یا فعالیت کلّی( IU ) آنزیم های الآسپاراژیناز
تعیین پروتئین کلّی ( mg ) آنزیم های الآسپاراژیناز
تعیین فعالیت ویژه( IU/mg ) آنزیم های الآسپاراژیناز
کشت سلول انسانی
تهیه محیط کشت RPMI0
۰ تاثیر آنزیم الآسپاراژیناز ll (نوترکیب)،الآسپاراژینازl و آنزیم استاندارد بر سلول های
سرطانی انسانی
۰ MTT Assay
تست تغییرات سیتوپلاسمی سلول های سرطانی بعد از انجام تست MTT
فصل سوم نتایج
بررسی و شماره گذاری کلنی ها
نتایج اعداد جذب محلول های استاندارد سولفات آمونیوم در طول موج nm0
بررسی اعداد جذب آمونیاک آزاد شده در محلول های به دست آمده از کلنی های جهش
یافته ۰
جداسازی و تکثیر ژن آنزیم الآسپاراژیناز ll
تعیین توالی قطعه ژنی laspsraginase ll
وارد کردن قطعه ژنی lasparaginase ll در وکتور pETa و تأیید آن
نتیجه SDSPAGE نمونه های آنزیمی الآسپاراژیناز ll , l و استاندارد
محاسبۀ فعالیت آنزیمی(IU) الآسپاراژینازll نوترکیب، الآسپاراژینازl و الآسپاراژیناز
استاندارد ۰
تعیین پروتئین کلّی (mg) آنزیم های الآسپاراژینازll نوترکیب، الآسپاراژینازl و ال
آسپاراژیناز استاندارد
۰ تعیین فعالیت ویژه( IU/mg ) آنزیم های الآسپاراژینازll نوترکیب، الآسپاراژینازl و
الآسپاراژیناز استاندارد
بررسی تأثیر آنزیم الآسپاراژینازll (نوترکیب)، الآسپاراژینازl و آنزیم استاندارد بر سلول
های سرطانی HeLa
بررسی تأثیر آنزیم الآسپاراژینازll (نوترکیب)، الآسپاراژینازl و آنزیم استاندارد بر سلول
های سرطانی LCL
بررسی تغییرات سیتوپلاسمی سلول های سرطانی بعد از انجام تست MTT
نقد و بررسی‌ها
هنوز بررسی‌ای ثبت نشده است.